慢病毒(Lentivirus)是一类改造自人免疫缺陷病毒(HIV)的病毒载体,基因组为RNA,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。 慢病毒基因组进入细胞后,DNA整合到细胞基因组中。慢病毒介导的基因表达或小RNA干扰作用持续且稳定,随细胞基因组的分裂而分裂。
纽赫生物慢病毒的生产和指控采取了国际学术界公认的标准流程,采用三质粒系统在293FT细胞中进行包装。所获得的病毒颗粒经过超速离心纯化,并通过荧光发对病毒基因拷贝进行滴定。一般情况下我们的慢病毒的滴度在108~109TU/ml,完全可以满足各类实验的使用要求。
慢病毒生产流程
step 1 慢病毒质粒构建及大量抽提
step 2 慢病毒骨架质粒与包装质粒共转染293T细胞
step 3 病毒收集与浓缩
step 4 滴度测定
慢病毒感染细胞时,由于细胞的来源、代数和细胞状态等因素的影响,MOI值在不同实验室也略有差异,下面我们提供公司部分细胞的慢病毒MOI感染参数,供实验参考(以下数据是细胞感染效率在80%细胞状态良好的情况下获得的):
<RNAi干扰(基因沉默)
<质粒构建
<稳定细胞株筛选
<非编码RNA研究
<一站式课题服务
<microRNA靶基因验证
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